双分子荧光互补技术服务

      双分子荧光互补技术( Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC)是一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。有报道在GFP的两个β片层之间的环结构(oop).上有许多特异位点可以插入外源蛋白而不影响GFP的荧光活性, BiFC技术正是利用该荧光蛋白家族的这- -特性,将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段，再分别与目标蛋白连接。如果两个目标蛋白因为有相互作用而接近，就使得荧光蛋白的两个分子片段在空间.上相互靠近，重新形成活性的荧光基团而发出荧光。在荧光显微镜下，就能直接观察到两目标蛋白是否具有相互作用,并且在最接近活细胞生理状态的条件下观察到其相互作用发生的时间、位置、强弱、所形成蛋白复合物的稳定性，以及细胞信号分子对其相互作用的影响等，这些信息对研究蛋白质相互作用有重要意义。

BiFC的应用:

确定两个蛋白质之间是否存在相互作用。

BiFC系统:

pCambia1300-35S-cYFP;

pCambia 1300-35S-nYFP.

服务内容:

1.构建包含目的蛋白的质粒;

2.重组目的质粒转化农杆菌:

3.农杆菌菌液注射烟草叶片:

4.共聚焦显微镜观察和拍照。

服务及价格: 

提交的产品和资料:

1.构建成功的目的蛋白载体;

2.转化成功的农杆菌甘油菌:

3.实验过程报告及相关图片。

设置4组实验:

1. pCambial 300-35S-A-cYFP + pCambia1300-35S _B-nYFP;

2. pCambial 300-35S-A-cYFP + pCambia1300-35S-nYFP;

3. pCambial 300-35S-cYFP + pCambial 300-35S-B-nYFP;

4. pCambial 300-35S-cYFP + pCambial 300-35S-nYFP. .