武汉迈斯普生物科技有限公司

自有实验平台  真实 高效 品质化科研服务

订购电话:

027-87002769

扫码即可咨询下单

网站首页 >> 送样需知 >>送样须知 >> 细菌透射电镜取材实验注意事项
详细内容

细菌透射电镜取材实验注意事项

1、细菌取材原则:

  细菌样品结构简单,一般分为液体培养及固定培养,观察又分为常规透射电镜或负染观察。取材时要区分对待。取材前,先查阅文献,明确实验目的,设计好实验流程,熟悉超微结构及分布,对需要观察的结构及特点需要有自己的判断。另外,戊二醛会影响抗原活性,如果课题需要做免疫性的实验,取材时需要用不同的固定液固定。固定对取材用器材及试剂,进行清洁及预冷,写好取材的标签。取材时,务必做到相同条件下取材,相同人员平行操作。固定液一般为2.5%电镜专用戊二醛。

2、细菌取材操作方法:

  2.1、对于观察细菌鞭毛、菌毛、纳米材料附着于细菌的样品:采用液体培养基培养。因为鞭毛容易脱落,在操作时尽量轻柔。对于能自然沉淀的细菌,可直接取细菌沉淀,PBS清洗2次,清洗时也让细菌自然沉淀不要离心,操作会残留部分培养基,但影响较小。如果细菌不能自然沉淀,只能低速离心,取沉淀固定。但是对于鞭毛易脱落的细菌,会有较大影响,我们会优先选择新鲜菌液进行实验。然后用2.5%戊二醛固定,4℃保存运输。送样时,同时提供新鲜菌液及戊二醛固定的菌液。

  2.2、对于观察细菌内部结构的样品:

  2.2.1、如果是液体培养基培养的细菌,可直接离心,弃上清,沉淀用PBS洗2次,加2.5%戊二醛固定。如果需要观察到材料在细菌上的附着,操作尽量轻柔,能自然沉淀就不要离心。且清洗的时候要小心。防止材料脱落。

  2.2.2、如果是固定培养的细菌,可用牙签挑取所需观察的菌落,直接置于2.5%戊二醛固定液中,4℃保存及运输。挑取的时候,尽量避免挑取培养基。