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透射电镜检测样品选材办法

时间:2021-05-17     【原创】   阅读

  透射电镜检测样品选材办法


  (一)透射电镜检测安排和器官选材办法:


  事前准备好所需的器械和固定液,并把它放4℃冰箱内预冷备用。如为穿刺物(肾安排、肝安排、脾安排等)、剪取物(胃镜剪取物、支气管镜剪取物、肠镜剪取物等)、手术切除物(肿瘤安排以及试验动物脏器等),均应在离体后敏捷用生理盐水冲刷后或直接投入预冷的2.5%戊二醛固定液(保质期为1个月)内,并把它放4℃冰箱内保存,一般要求在两分钟内完结。在处理手术切除物时,应事前准备好两把尖利的刀片(如剃须刀或手术刀)和蜡板,把固定液滴在蜡板上,再把切下来的脏器用手术刀切成小块,放在蜡板上的固定液中,接着用双刀片拉锯法在固定液中将安排切成约1立方毫米巨细或横切面约1平方毫米的长条形,然后用牙签或镊子(悄悄夹住,制止揉捏)把安排移入装有固定液的小瓶内,瓶子主张用带螺纹密封的样本瓶(见下图),保证固定液不会溢出,固定液一定要加注到瓶子的九成满。如为肺安排,应在固定液中充沛震动,使其完全沉到瓶底停止。

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  (二)透射电镜检测游离细胞选材法:


  安排培育和游离细胞(如血细胞、掉落细胞以及细菌病毒等),常悬浮涣散在介质中,首要有必要将其凝聚成团,然后进行固定,详细做法如下:


  1、血浆凝聚法:将抗凝全血离心分层(2000转/每分钟,10—20分钟),用毛细吸管沿着管壁悄悄的将上清夜汲取(不要损坏白细胞层),接着用吸管汲取固定液,并沿着管壁将2.5%戊二醛固定液慢慢地参加进行固定,然后把它放在4℃冰箱内保存。


  2、血浆(血清)混合法:如为细菌、病毒、掉落细胞、培育细胞则先将它们制成悬液放置于离心管内(最好是玻璃的),离心成团(1000~3000转/分钟,10分钟,下同),去上清液后参加2.5%戊二醛固定10分钟左右,离心,再弃去多余的固定液,然后和少量抗凝血浆或血清混合均匀,离心成团,去上清液(留少量),用吸管汲取2.5%戊二醛固定液沿着离心管壁缓慢滴入,尽量防止团块涣散,静置于4℃冰箱内保存备用。

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