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研究新课题外泌体检测第一步

近年来,外来体以闪电般的速度变得流行。关于外泌体的研究已逐渐从利基市场转移到普通大众,受到越来越多的关注,并且涌现出了大量的外泌体。但是每个人仍然觉得外泌体的研究是如此困难!为什么?主要原因是在该领域仍然没有统一,简单,可行和高度纯净的分离方法。每个外泌体研究者注定要担心外泌体的分离,纯化和鉴定。今天,编辑将与您讨论如何实现外泌体检测研究的第一步。


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分离的方法主要有二种:

第一种:超速离心法

       超速离心是分离外泌体的最常用技术之一。据不完全统计,大约有1/2的研究人员会选择这种方法来分离外泌体。该方法包括几个离心步骤,这些步骤可以逐步去除细胞,细胞碎片和大囊泡,并沉淀外泌体。但是,这种方法用于粘性生物流体(如血浆和血清)时效率较低,重复离心操作可能会损坏外泌体,从而降低其质量。

第二种:聚合物沉淀法:

       通常,将含聚合物的沉淀溶液与生物流体混合,在4°C下孵育,然后低速离心以沉淀外泌体。目前,有成熟的基于PEG的商业试剂盒。这些套件易于使用和快速使用,不需要其他设备。随着产品的不断升级,提取效率和提纯效果逐渐提高,从而逐渐取代了超速离心法。推广它。沉淀法的主要缺点是分离物中会有少量的聚合物。


透射电子显微镜可以清楚地看到外来体的大小和形态,这是鉴定方法中的金标准,另外两种方法通常用作辅助手段,鉴定方式主要有三种:

      1.形态学(电镜);

      2. 粒子大小(径粒分析);

      3.标志蛋白(WB)。

      

      让癌细胞分泌的外泌体“无处躲藏”,现在您已经知道如何开始进行外泌体检测研究的第一步了,对吗?


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