植物切片卢戈氏染色实验步骤

1、脱水浸蜡：将样品整理好放入脱水盒中。将脱水盒放进脱水机内依次梯度酒精脱水。75%酒精4h，85%酒精2h，90%酒精2h，95%酒精2h，无水乙醇I 1h，无水乙醇II 1h，醇苯混合液5-10min，二甲苯I 5-10min，二甲苯II 5-10min，62℃蜡苯混合液2h，62℃融化石蜡I 4h，62℃融化石蜡II 4h。

2、石蜡包埋：将浸好蜡的组织转移到包埋机上进行包埋。先将少量融化石蜡加入包埋框，待蜡凝固之前将样品从脱水盒内取出放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却，待蜡完全凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。

3、石蜡切片：将修整好的蜡块夹到石蜡切片机切片上，切片厚度8-10μm进行切片。蜡带漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织摊平，然后用防脱载玻片将组织捞起，于60℃烘箱内烤片。水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。

4、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min，二甲苯Ⅱ15min，无水乙醇Ⅰ5min，无水乙醇Ⅱ5min，85%酒精5min，75%酒精5min，蒸馏水洗。

5、卢戈氏染色：切片入卢戈氏染液浸泡染色，5min。自来水稍洗，洗去多余染液即可。然后依次进入50%乙醇，70%乙醇，80%乙醇，无水乙醇三缸脱水。

6、透明封片：切片入干净的二甲苯透明5min，中性树胶封片。

7、数据采集：切片于显微镜下采集相关数据。