外泌体注射用药方法大全
一 外泌体分离UC：差速超速离心分离
UF:超滤分离浓缩
PEG：聚合物沉淀法
SEC:分子尺寸排阻法
PS：膜亲和分离法
操作步骤于底部联系我们
二 外泌体定量
颗粒数量：纳米颗粒追踪分析（NTA）,纳米流式（nanoFCM）蛋白含量：Bradford比色法，BCA蛋白定量法
总脂质含量：ulfophospho-vanillin assay（硫酸-香草醛法），荧光染料法，全反射傅里叶变换红外光谱（ATR-FTIR）
迈斯普可提供全套鉴定定量服务
三 动物注射方法
静脉注射（I.V）
心肌内注射（I.M.C）或者瘤内注射（I.T）
冠状动脉注射（I.C）
腹腔内注射（I.P）
脑室内注射（I.C.V）
皮下注射
鼻腔液滴
四 实验案例及推荐
目前尚未建立综合考虑药代动力学和药效学的EV体内给药通用指南，我们从靶向疾病、给药途径、EVs注射量、给药频率、EVs细胞来源及培养条件、纯化方法、治疗使用天然或工程化EVs等方面对研究进行了对比分析，我们根据目标疾病类型将数据集分为4个不同的组：心血管疾病（表1）、神经系统疾病（表2）、恶性肿瘤（表3）和系统性疾病（表4）
表1
疾病模型 | 动物 | 注射 | 给药方案 | 分离 | 来源 |
心肌梗死 | 小鼠 | I.V | 在疾病诱导后（p.d.i）立即用生理盐水注射0.4 μg EV蛋白 | SEC | MSC |
心肌梗死 | 小鼠 | I.V | 在给药后0 h、4 h、24 h、48 h和7 d，用PBS注射200 μg EV蛋白，共5次 | UC | mBM-MSC |
心肌梗死 | 大鼠 | I.M.C | PBS中300 μg EV蛋白1次注射，给药后60 min | UF | MSC |
心肌梗死 | 猪 | I.C | 在给药后即刻（p.d.i）用PBS注射7.5 mg EV蛋白 | PEG | hIPSCs |
表2
神经疾病疾病模型 | 动物 | 注射 | 给药方案 | 分离 | 来源 |
脑脊髓炎 | 小鼠 | I.V | 在给药后第1、3、5、7、9和11天，分别用PBS配制5×10 个颗粒进行6次注射 | UF-SEC
| hBM-MSC
|
创伤性脑损伤 | 大鼠 | I.V | 在给药后4-6小时、24-26小时及48-50小时分别注射3次1×10 颗粒的PBS溶液 | UF | hESC
|
创伤性脑损伤 | 小鼠 | I.C.V
| 1次注射10 μg EV蛋白，1h p.d.i | UC | 胶质细胞 |
帕金森病
| 小鼠
| 鼻内
| 每隔一天给予1.2×10九次方颗粒的PBS溶液，持续两周 | UC
| RAW264.7 |
野生型 | 小鼠 | I.C.V | 每天使用渗透泵灌注1 μg HTTsiRNA，负载于2-3×10 个PBS中，持续7天 | UC | 胶质肿瘤细胞 |
表3
癌症靶向疾病模型 | 动物 | 注射 | 给药方案 | 分离 | 来源 |
胰腺癌 | 小鼠 | I.P | 研究结束前3天，每隔一天在PBS中注射1×10 颗粒，直至研究结束 | UC | hBJ |
骨髓瘤 | 小鼠 | 皮下 | 在肿瘤细胞接种前6天，用PBS注射30 μg EV蛋白 | UC | J558 |
黑色素瘤 | 小鼠 | I.T | 在肿瘤接种后第35天，每48小时用PBS注射4次200 μg EV蛋白 | UC | K562 |
慢性髓性白血病 | 小鼠 | I.P | 每周1次I.P注射，持续3周，每次10 μg PBS中的EV蛋白，给药后7天 | UC | HEK293T |
表4
系统性疾病
DSS诱导的结肠炎 | 小鼠 | I.P | 从第1天至第8p.d.i.，以PBS配制的溶液进行8次注射，每次50 mg/kg（=90-100 μg EV蛋白） | PEG | 巨噬细胞 |
CLP所致脓毒症 | 小鼠 | I.P | 在给药后0、6、12和18小时，分别注射4次1×10 个颗粒的PBS溶液 | UF-SEC | HEK293T |
溃疡性结肠炎 | 小鼠 | 灌胃 | 4次口服给药 | UC | 牛乳 |
疾病模型 | 动物 | 注射 | 给药方案 | 分离 | 来源 |
CCL4诱导小鼠肝纤维化 | 小鼠 | I.V | CCL4注射后24 h，用PBS注射200 μg EV蛋白1次（在4周内重复8次） | UF | HEK293T |
当前临床试验中的剂量确定主要基于细胞外囊泡颗粒数量，而由于多数研究采用局部给药途径，与临床前研究数据的对比存在一定难度。此外，由于细胞外囊泡（EVs）具有全身组织分布的特殊能力，并在血浆中呈现非线性药代动力学特征，因此亟需可靠的路线图来推算临床前模型患者的EV剂量。
更详细实验步骤和原始数据可联系迈斯普生物科技有限公司！
