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透射电镜放大倍数选择指南说明:本指南中举例说明了我们电镜常用的倍数。建议选择2-3个倍数。倍数太多,视野则会很少。倍数太少。无法兼顾大视野及局部放大。一、根据照片标尺可得到以下照片范围,可以根据目标物大小,结合实际情况,进行倍数选择。1000倍:长*宽=40um*32um2500倍:长*宽=18um*13um5000倍:长*宽=9um*6.5um10000倍:长*宽=4.5um*3.3um20000倍:长*宽=2.3um*1.7um二、动物组织及细胞:(建议2500/5000/10000这样3个倍数逐级放大,或者2000/6000这样2个倍数逐级放大)1、通常2000-2500倍可以有1个完整细胞。体积较大的细胞例
注意事项:● 采集的样本需要符合纳入标准:如年龄、肥胖(身高、体重)、血糖血脂血压、诊断情况 等。● 统一早晨空腹采血,尽量避免样本间的差异影响。● 如个别样本发生溶血,则弃掉。● 样本编号用油性笔清楚地写在管壁及管盖上。● 离心管在放入冰箱前,用封口膜密封。● 如果提供的是冻存细胞株,需提供详尽的复苏方法。● 细胞培养基必须使用去除 exosome(de-exosome)的血清或者无血清培养基(例如 Thermo Fisher 的 SFM)。● 分离外泌体前的样品不能加入任何 RNA 保护剂(如 Trizol)。● 分离好的外泌体如需进行电镜观察,需要
神经取材原则: 神经组织结构较为复杂,取材前,先查阅文献,明确实验目的,设计好实验流程,熟悉组织结构及分布,对需要观察的结构需要有组织学位置判断。另外,戊二醛会影响抗原活性,如果课题需要做免疫性的实验,取材时需要用不同的固定液固定。神经组织可以不灌注取材,如果灌注,请一定保证灌注充分,灌注不充分效果会远低于不灌注。对于未进行灌流固定的动物最好先进行电镜标本的取材,以免组织自溶,影响超微结构的观察。对取材用器材及试剂,进行清洁及预冷,写好取材的标签。取材时,务必做到相同条件下取材,相同人员平行操
生物样品透射电镜取材注意事项 取材是电镜实验的第一步,其操作成功与否直接关系到电镜结果的效果 及成败。为了得到好的结果,请务必按要求做好取材!取材基本要点:快 (1min)、冷(4 ℃)、小(1 mm3)、净(无杂质)、准(部位准确)。不 同的样品,取材细节上有很大区别,有任何疑问,请扫描右方二维码,即可 获得专业一对一电镜实验及解图指导!一、动物组织取材流程及要求 取材流程:动物麻醉或断头急性处死,解剖取出所需的器官或组 织,生理盐水简单冲洗血液及组织液。按要求将组织切成1mm3左 右小块,固定于组织及细胞电镜
1:选择材料 根前面有白点的根 2:取样 根尖发芽后 0.5-2cm 左右根尖(取材时间早上 8:00-9:00,中午 11-12 点取根尖,下午 4:00-5:00,),取材时应注意找到有白点的位置(分生区),白色稍微变暗一点开始取材料,具 体的时间根据实验情况来定,取整个根尖的部分 1.3-1.8cm。
肺组织取材原则: 肺组织结构较为简单,取材前,先查阅文献,明确实验目的,设计好实验流程,熟悉组织结构及分布,对需要观察的结构需要有组织学位置判断。另外,戊二醛会影响抗原活性,如果课题需要做免疫性的实验,取材时需要用不同的固定液固定。肺组织尽量灌注取材,灌注时请一定保证灌注充分,灌注不充分效果会远低于不灌注。对于未进行灌流固定的动物最好先进行电镜标本的取材,以免组织自溶,影响超微结构的观察。对取材用器材及试剂,进行清洁及预冷,写好取材的标签。取材时,务必做到相同条件下取材,相同人员平行操作。固定
细胞样品取材原则:细胞样品结构简单,一般分为悬浮培养及贴壁培养。贴壁培养建议使用6cm-10cm的培养皿培养,这样有足够的细胞量且方便操作。取材前,先查阅文献,明确实验目的,设计好实验流程,熟悉超微结构及分布,对需要观察的结构及特点需要有自己的判断,根据不同的实验目的,制定取材计划。另外,戊二醛会影响抗原活性,如果课题需要做免疫性的实验,取材时需要用不同的固定液固定。固定对取材用器材及试剂,进行清洁及预冷,写好取材的标签。取材时,务必做到相同条件下取材,相同人员平行操作。固定液一般为2.5%电镜专用戊二醛。
脂肪组织取材原则:脂肪组织是电镜实验中比较难处理的一类样品,取材前,先查阅文献,明确实验目的,设计好实验流程,熟悉组织结构及分布,对需要观察的结构需要有组织学位置判断。另外,戊二醛会影响抗原活性,如果课题需要做免疫性的实验,取材时需要用不同的固定液固定。脂肪组织不灌注,直接取材。对取材用器材及试剂,进行清洁及预冷,写好取材的标签。取材时,务必做到相同条件下取材,相同人员平行操作。固定液一般为2.5%电镜专用戊二醛,灌流固定选用3%多聚甲醛1%戊二醛。
植物组织取材原则:植物组织取材较为简单,取材前,先查阅文献,明确实验目的,设计好实验流程,熟悉组织结构及分布,对需要观察的结构需要有组织学位置判断。另外,戊二醛会影响抗原活性,如果课题需要做免疫性的实验,取材时需要用不同的固定液固定。固定液一般为2.5%电镜专用戊二醛。
细菌取材原则:细菌样品结构简单,一般分为液体培养及固定培养,观察又分为常规透射电镜或负染观察。取材时要区分对待。取材前,先查阅文献,明确实验目的,设计好实验流程,熟悉超微结构及分布,对需要观察的结构及特点需要有自己的判断。另外,戊二醛会影响抗原活性,如果课题需要做免疫性的实验,取材时需要用不同的固定液固定。固定对取材用器材及试剂,进行清洁及预冷,写好取材的标签。取材时,务必做到相同条件下取材,相同人员平行操作。固定液一般为2.5%电镜专用戊二醛。
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